1．濾光片波長精度檢查及其峰值測定：用高精度紫外可見分光光度計（波長精度±

0.3nm）對不同波長的濾光片進行光譜掃描，檢測值與標定值之差即為濾光片波長精度，其差值越接近于零且峰值越大表示濾光片的質量越好。

2．靈敏度和準確度：（1）靈敏度：加200µl  6µg/ml重鉻酸鉀溶液于小孔中，以0.05mo1

／L硫酸溶液作空白，于450nm（參比波長650nm）測定，其吸光度應≥0.01（2）準確度：準確配制1mmol/L對硝基苯酚水溶液，以10mmo1／L氫氧化鈉溶液25倍稀釋后加入200µl

于小孔杯中作空白，于405nm（參比波長650nm）檢測，其吸光度應在0.4左右。

3．通道差與孔間差檢測：（1）通道差檢測：取一只酶標微孔杯以酶標板架作載體，將其內含200 μl甲基橙溶液，吸光度0.5左右先后置于八個通道的相應位置，蒸餾水調零，采用雙波長（測定波長490nm，參比波長630nm或650nm）連續測三次，觀察其不同通道之間測量結果的一致性（2）孔間差的測量：選擇同一廠家、同一批號酶標板條（8條共96孔）分別加入200µl甲基橙溶液（吸光度調至0.065～0.070）先后置于同一通道，蒸餾水調零，采用雙波長檢測，其誤差大小用±1.96s衡量。

4．零點飄移：取8只小孔杯，分別置于8個通道的相應位置，均加入200µl蒸餾水并調零，采用雙波長或單波長（490nm）每隔30min測定一次，觀察8個通道4h內的吸光度變化，其與零點的差值即為零點飄移。

5．精密度評價：每個通道3只小杯，分別加入200µl高、中、低三種不同濃度的甲基橙溶液，蒸餾水調零，采用雙波長作雙份平行測定，每日測定兩次，連續測定20天。分別計算其批內精密度、日內批間精密度、日間精密度和總精密度及相應的CV值。

6．線性測定：準確稱取甲基橙配制5個系列濃度的溶液，采用雙波長平行檢測8次，求其均值。計算回歸方程、相關系數r及標準估計誤差Sy,x，并用±1.96Sy,x表示樣品的95％測量范圍。

7．雙波長評價：取同一廠家、同一批號酶標板條（每個通道2條共24孔）每孔加入200µl

甲基橙溶液（吸光度調至0.065～0.070 ）先后于8個通道分別采用單波長（490 nm）和雙波長（測定波長490nm、參比波長630 nm／650nm）進行檢測，計算單波長和雙波長測定結果的均值、離散度，比較各組之間是否具有統計學差異以考察雙波長清除干擾因素的效果。